Вскоре после того, как Мишел и Даттон [53] разработали 15 лет назад методы культивирования клеток, с помощью которых можно было получать антителообразующие клетки in vitro, были проведены эксперименты, показавшие, что для развития В-клеточного ответа необходимы Т-лимфоциты [54]. Были сделаны попытки выяснить, каким образом Т-лимфоциты способствуют возникновению антителообразующих клеток. В результате было сделано пред-положение, что Т-клетки можно заменить супернатантами от активированных лектинами (или антигенами) Т-клеток [55]. Поскольку подобные супернатанты действительно обладали способностью заменять Т-лимфоциты, появилась гипо-теза о существовании фактора, заменяющего Т-клетки (ТЗФ, TRF). На основании ранних данных о том, что для оптимального ответа нужно через 48—72 ч. после начала культивирования добавлять содержащий ТЗФ супернатант [56— 59], было высказано предположение, что «поздно действующий» ТЗФ дает сигнал, требующийся для дифференцировки В-бластоз в плазматические кле ...

В течение последних двух лет было опубликовано несколько сообщений о том, что В-клеточная пролиферация вызывается фактором роста В-клеток (BCGF). Возможность поддерживать длительную пролиферацию культур чело-веческих [65] и мышиных [66] В-лимфоцитов с помощью кондиционированнойсреды от стимулированных мононуклеарных клеток явилась первым свидетель-ством роли растворимых факторов в пролиферации В-клеток. Как и в случае поддерживаемого кондиционированной средой роста Т-клеток, длительная пролиферация В-лимфоцитов не требует повторного воздействия антигена на иммуноглобулиновые рецепторы. Этот факт убедительно свидетельствует о том, что митоз В-клеток запускается независимым от антигенного стимула сигна-лом(ами). Несмотря на первые обнадеживающие эксперименты, длительно поддерживаемые культуры и клоны В-клеток не получили широкого распро-странения главным образом потому, что не были определены оптимальные усло-вия роста В-лимфоцитов. Кроме того, большинство исследователей столкнулось с пр ...

IL-1 приписывают разнообразные биологические эффекты (например, ак-тивацию Т-клеток, регуляцию температуры тела, стимуляцию пролиферации фибробластов, активацию синовиальных клеток) [25], однако поскольку био-логическую активность IL-1 традиционно тестируют по пролиферации тимо-цитов и поскольку эксперименты, свидетельствующие о наличии у IL-1 дополнительных активностей, были проведены с неочищенными или частично очищенными препаратами IL-1, по-видимому, надежнее ограничить обсуждение функциональной ролью IL-1 в пролиферации Т-клеток. Следует отметить, что до последнего времени недооценивали важную роль IL-1 макрофагов в активации Т-клеток. Объясняется это главным образом тем, что вызываемая антигеном активация Т-клеток считалась зависимой от макрофагов, в то время как активация, вызываемая лектинами,— независимой от макрофагов. Таким образом, предполагалось, что вклад макрофагов ограничивается процессингом анти-генов и презентированием их Т-клеткам вместе с продуктами главного к ...

В связи с тем что недавно были опубликованы обзоры [4, 25], в которых подробно обсуждаются биохимические свойства IL-1 мыши и человека, читателям для получения детальной информации рекомендуется использовать указанные источники. Следует отметить трудность оценки существенной части аналитических биохимических исследований, выполненных до 1980 г., так как количественного анализа активности IL-1 в процессе выделения не проводилось: биологическую активность определяли лишь для одной концентрации каждой полученной фракции (как правило, для разведения 1 : 4). Кроме того, в большинстве случаев биохимической очистке подвергались незначительные количества кондиционированной среды (1—10 л), причем до последнего времени большая часть исследований была осуществлена с супернатантами культур клеток, которые были активны в разведенных от 1 : 5 до 1 : 10. Если биологическая активность IL-1 в количественном отношении подобна активности интерферона, то, по-видимому, концентрация IL-1 в этих суперн ...

С момента обнаружения в 1972 г. Шимпл и Веккером [56] «поздно дей-ствующего» ТЗФ считалось, что конечный этап дифференцировки пролифери-рующих В-бластов в иммуноглобулин-секретирующие плазматические клетки протекает под воздействием продуцируемого Т-клетками лимфокина(ов). Однако исследование молекулярных характеристик ТЗФ и механизма его действия на пролиферирующие В-клетки развивались медленно. Заметный интерес к роли лимфокинов в дифференцировке В-лимфоцитов возник в последние годы. Возможность исследования этих молекул была обусловлена появлением более совершенных методов культивирования клеток, успехами в изучении генетических основ образования иммуноглобулинов и перегруппировки генов их тяжелых цепей и, наконец, правильной оценкой полученных ранее данных, в свое время неправильно интерпретированных из-за загрязнения культур Т-клетками.

Поскольку зрелые В-лимфоциты экспрессируют мембранный IgM, очевидно, что перегруппировка генов, необходимая для транскрипции и ...

Тот факт, что растворимые макромолекулы, синтезируемые макрофагами, усиливают секрецию IL-2, в существенной степени помог объяснить необходи-мость макрофагов для Т-клеточного пролиферативного ответа in vitro. Еще предстоит выяснить, объясняется ли обнаруженная гетерогенность IL-1 по заряду наличием нескольких родственных, но не идентичных пептидов или же вариация заряда обусловлена разной степенью гликозилирования одного и того же пептида. Следует также подчеркнуть, что при использовании современных методов биохимической очистки микрогетерогенность пептида может остаться незамеченной. Поэтому следует соблюдать осторожность, приписывая способность вызывать митоз Т-лимфоцитов лишь одному полипептиду. Аналогичным образом, прежде чем считать, что пептид известный нам как IL-1 (определяемый по пробе на пролиферативную активность тимоцитов), проявляет несколько биологических активностей, следует провести биологические испытания гомогенного пептида. Что касается влияния IL-1 на Т-клет-ки, ...

В результате разработки в конце 60-х годов методов тестирования цито-токсического действия Т-клеток [46, 47], а затем, в начале 70-х,— методов получения in vitro антиген-специфического ответа со стороны цитоксических Т-лим-фоцитов [48] появилась возможность использования клеточных систем для проверки влияния лимфокинов на функциональную активность цитотоксических Т-клеток. Вскоре стало очевидным, что для развития максимальной цитотокси-ческой активности в смешанных культурах лимфоцитов необходимо присутствие как макрофагов, так и нецитолитических хелперных Т-клеток. Почти одновременно с обнаружением фактора роста Т-клеток было показано, что Т-хелперы можно заменить кондиционированной средой, полученной от стимулированных нормальных мононуклеарных клеток [49]. Когда возникла концепция о функ-циональной взаимосвязи IL-1 и IL-2 и когда выяснилось, что присутствие этих лимфокинов обязательно для роста клонов Т-клеток, было высказано пред-положение, что секретируемая Т-хелперами активност ...

В отличие от IL-1 и IL-2, участвующих в пролиферативном ответе Т-кле-ток, биологическое и биохимическое изучение лимфокинов, вызывающих пролиферацию и дифференцировку В-лимфоцитов, только начинается. Все же из рассмотренных выше работ уже можно сделать некоторые выводы, которые, с одной стороны, требуют подтверждения, а с другой — служат хорошей основой для дальнейших экспериментов. Кажется вполне вероятным, что пролиферация, обеспечивающая клональный рост В-клеток, также как и Т-клеток, вызывается специфичными к В-лимфоцитам факторами роста. Кроме того, как и в случае Т-клеток, факторы роста В-клеток скорее всего взаимодействуют со специфическими рецепторами, имеющимися только на активированных антигеном В-клетках. По сравнению с дифференцировкой Т-лимфоцитов диффе-ренцировка В-лимфоцитов отличается большой сложностью и в нее могут быть вовлечены несколько сходных, но различных ФДВК. Возможно, что переключение биосинтеза с мембранной формы |1-цепи на секреторную и последующее пере ...

Ряд данных указывает на то, что митоз Т-клеток обусловлен взаимодействием растворимых факторов, секретируемых Т-к летками, с активированными антигеном (или лектином) Т-лимфоцитами. Как уже было отмечено в предыдущем разделе, когда речь шла об IL-1, тщательное удаление макрофагов предотвращает биосинтез ДНК и деление клеток под действием антигена или лектина [26, 32]. Этот факт убедительно свидетельствует о том, что сигнал к делениюклетка получает не от лектина или антигена. Дополнительные доводы в пользу такого предположения дает изучение механизма торможения глюкокортикоидами деления Т-клеток. Детальные исследования показали, что глюкокортикоиды ингибируют митоз стимулированных антигеном (или лектином) Т-клеток, изби-рательно влияя на секрецию IL-2, причем этот эффект зависит от концентрации фактора [34, 35]. Действие глюкокортикоидов не связано с общим подавлением метаболизма Т-клеток: на это указывает обратимость ингибирования пролифе-рации Т-клеток, вызываемого глюкокортикоидами ...

Изучение лимфокинов, действующих на Т-клетки, в основном ограничивалось факторами, выполняющими роль митогенов. Объяснялось это тем, что в течение более чем 10 лет — с 1960 по 1972 г.— не было ни одного теста,кроме теста на пролиферацию Т-клеток. Когда были разработаны методы, позволяющие исследовать образование in vitro антителообразующих клеток, а также цитолитических, хелперных и супрессорных Т-лимфоцитов, появилась воз-можность при изучении лимфокинов анализировать и указанные процессы дифференцировки. Однако в большинстве случаев из-за сложности применяемых методов было трудно отличить вклад лимфокинов, вызывающих пролиферацию, от вклада лимфокинов, обусловливающих дифференцировку.

История изучения митогенных лимфокинов подробно рассматривается в отдельных обзорах [3,4], и нет никакой необходимости останавливаться здесь на ней, кроме лишь как для того, чтобы описать некоторые открытия, обусловившие наиболее существенные успехи в изучении этого вопроса. Область ...