Подобный экспериментальный подход может быть использован для изу-; чения способности Т-клеток NR-животных отвечать на антиген, презентированный на АПК отвечающего /?-гаплотипа. Типичный эксперимент из этой серии заключается в переносе клеток костного мозга донора линии NR летально облученным реципиентам Fx (R X NR) [44, 45]. Иммунизация антигеном, на который не отвечают животные донорской линии, как и предполагалось, не вызывает иммунного ответа у таких химер, NR -*- Fx (R X NR), так как АПК этих животных полностью представлены клетками NR-типа, созревающими из стволовых клеток трансплантированного костного мозга. Однакоесли перенести Т-клетки химер NR ->> Fj (NR X R) второму облученному ре-ципиенту Fj (R X NR) вместе с АПК Fj-происхождения, то при последующей иммунизации этих животных можно индуцировать ответ. Кроме того, в опытах in vitro показано, что Т-клетки, созревающие из костного мозга NR-донора, могут активироваться и отвечать на антиген в сочетании с гистотопами молекул ...

Эти теории предполагают, что а) антиген (или фрагменты антигена) и мо-лекулы класса II взаимодействуют друг с другом с определенной специфичностью и б) ареактивность может быть обусловлена отсутствием взаимодействия данного антигена и данной молекулы класса II или низкой авидностью такого взаимодействия, в результате чего образования эффективного комплекса не происходит. Согласно этим теориям, на антигене и молекулах класса II имеются участки, определяющие такое взаимное распознавание. Таким образом, можно ожидать, что на антигенном фрагменте, участвующем в процессе двойного узнавания, имеются два различных участка [14]. Эпитоп, о котором уже гово-рилось, является участком, распознаваемым Т-клеточным рецептором; агретоп (agretop — от antigen-restriction element interaction site) представляет собой
тот участок антигена, который непосредственно взаимодействует с молекулой класса П. По аналогии предполагается, что молекула класса II также имеет два участка: гистотоп, или участок ...

Наиболее четкое доказательство потенциальной иммунореактивности Т-клеток животных линий NR было получено при исследованиях радиационных костномозговых химер. Такие мыши широко использовались для выяснения во-проса, является ли признак МНС-рестрикции Т-клеток врожденным или приоб-, ретенным. Детальный анализ этого подхода можно найти в гл. 15. В этих экспе-; риментах клетки костного мозга линии X, из которых тщательно удаляли зре-! лые Т-клетки, переносили летально облученным реципиентам ?± (X X Y), : причем линии X и Y различались по МНС. Такие химеры обозначаются X —>¦ ; ->F1(X X Y). Костномозговые клетки, содержащие клетки-предшественники гемопоэза, в облученном реципиенте дают начало лимфоидным клеткам, включая Т-клетки и макрофаги. Т-клетки линии X при созревании в животном Fj (X X Y) индуцируют толерантность под влиянием среды дифференцировки гибридов Fj. Если таких животных иммунизировать данным антигеном, то индуцированные иммунные Т-клетки буду ...

Из описанных выше экспериментов ясно, что большинство Т-лимфоцитов распознает антигены только в ассоциации с продуктами генов МНС. Поэтому, как показано на рис. 15.4, в основе общей схемы МНС-рестриктированных кле-точных взаимодействий в ходе иммунного ответа лежит представление о том, что Т-лимфоцит обладает рецепторной структурой с двойной специфичностью: один компонент специфичен к молекуле МНС, а другой — к антигену. Для активации индукторных Т-лимфоцитов макрофаг должен презентировать и антиген, и молекулы класса II. После активации такая клетка может принимать участие в МНС-рестриктированных взаимодействиях с В-лимфоцитами благодаря распознаванию молекул класса II на поверхности В-лимфоцита в сочетании с антигеном, который, по-видимому, связывается иммуноглобулиновыми рецепторами В-клетки. Как отмечалось ранее, некоторым субпопуляциям В-лимфоцитов не нужен непосредственный контакт с Т-клетками и их нерестриктированная активация происходит в присутствии ант ...

Данные о сочетанном Т-клеточном распознавании молекул МНС класса II при зависимом от Ir генов и «обычном» иммунном ответе, а также данные об отсутствии у мышей Fx (R X NR) зрелых Т-клеток, специфичных к антигену в сочетании с молекулами МНС класса II неотвечающей линии (NR), убедительно свидетельствуют, что продуктами генов Ir являются молекулы класса II. Однако, поскольку /r-контроль исходно был определен как способность животного отвечать или не отвечать на данный антиген, для окончательного доказательства идентичности молекул класса II и продуктов генов Ir необходимо показать, что молекулы класса II определяют способность животных давать первичный, контролируемый Ir генами иммунный ответ на тимусзависимый антиген.

Для подтверждения этого положения мы вновь обратимся к экспериментам по изучению комплементации генов I-A и 1-Е при образовании молекул 1-Е класса II, а также к исследованиям мышей, несущих мутантные гены гистосов-местимости класса II. Существенный для ...

Как известно, в тимусе имеются эпителиальные клетки, несущие молекулы класса II [48], а также макрофаги, экспрессирующие молекулы класса II [461. Вероятно, эти молекулы имеют важное значение для селекции Т-клеток с сочетанной специфичностью к гистотопам молекул класса II и эта селекция формирует экспрессируемый репертуар Т-лимфоцитов. Скорее всего, в основе такой селекции лежит существование в популяции предшественников Т-лим-фоцитов отдельных клеток, способных сочетание распознавать молекулы МНС мышей практически всех гаплотипов. При селекции в тимусе Т-клеток с со-четанной специфичностью к молекулам класса II, экспрессированным на клетках данного тимуса, по-видимому, отбирается популяция Т-клеток, способных распознавать и отвечать на определенный набор антигенов в ассоциации с ги-стотопами данных молекул МНС. Антигены, на которые могут отвечать мыши данного гаплотипа МНС, как раз и составляют эту группу антигенов. ...

Детальное изучение иммунного ответа на различные антигены показало, что контроль иммунного ответа генами Ir главного комплекса гистосовмести-мости является общим правилом. Ответ на многие антигены контролируется геном (генами), локализованным в субобласти I-A, т. е. в той же самой области МНС, в которой картирован и Ir-1. Ответ на вторую большую группу антигенов контролируется генами /г, картируемыми в субобласти 1-Е МНС. Как правило, для иммунного ответа, который контролируется генами /г, ассоциированными с 1-Е, требуется также наличие «отвечающего» аллеля субобласти I-A МНС. Таким образом, гены /г, кодируемые в субобласти 1-Е, являются частью комплементирующей пары генов /г; для развития ответа необходимы «отвечающие» аллели и того и другого локуса [7].Гены Ir также были картированы в субобласти I-B МНС [8]. Поскольку до сих пор не обнаружен белковый продукт этого локуса и не установлено ре-стрикционного полиморфизма ДНК, относящейся к субобласти I-B, был сделан вывод о том, что ло ...

В этой главе контроль иммунного ответа, осуществляемый генами Ir, рассматривается главным образом как частный случай контроля клеточных взаимодействий генами МНС. В самом деле, именно в ходе исследований отдель-ных случаев ареактивности, контролируемой генами Ir, возникли одни из наи-более глубоких представлений о роли молекул класса I и II в клеточных взаи-модействиях. Из этой главы читателю должно стать ясно, что исследование /г-генного контроля иммунного ответа поможет найти новые подходы к выяс-нению природы, специфичности и генетической организации Т-клеточных рецепторов. Изучение /г-генного контроля в этом аспекте ведется в настоящее время с высокой интенсивностью, в частности благодаря разработке серологи-ческих, химических и молекулярно-генетических методов для этих исследований.
Наконец, вполне возможно, что контролируемый генами Ir иммунный ответ лежит в основе ассоциации определенных патологий человека и животных с гаплотипом главного комплекса гистосовместимости [6 ...

Такого рода эксперименты позволили прийти ко второму важному, хотя, возможно, и противоречивому заключению. Химеры, полученные при переносе костномозговых клеток Fx (R X NR) облученным реципиентам R, не способны отвечать на антигены, на которые животные линии NR сами по себе не отвечают [44, 45]. Поскольку у химер представлены АПК Fx (R X NR), которые созревают из трансплантированного костного мозга, ареактивность нельзя объяснить отсутствием таких АПК. Более того, введение химерным животным «свежих» АПК Fx (R X NR) животных или перенос Т-клеток химер другому облученному реципиенту ?х (R X NR) не достаточны для ответа этих Т-клеток. Таким образом, Т-клетки, полученные из костмозговых клеток отвечающих (R) животных, по-видимому, утрачивают способность к ответу в результате созревания в NR-реципиенте. По некоторым данным у химер развивается состояние специ-фической супрессии, что объясняет отсутствие иммунореактивности [46]. Однако в настоящее время большинство экспериментальных данн ...

Открытию генов Ir способствовали работы, показавшие, что отдельные особи или линии животных не отвечают на антигены, на которые отвечают другие представители вида. Определяемые таким способом гены/г, как правило, конт-ролируют ответ на «простые» антигены. Среди этих антигенов: а) полимеры аминокислот, такие, как линейные сополимеры (например, GL или GT) и полимеры с разветвленной цепью (например, (Т, G)-A—L и (Н, G)-A—L; б) чистые белки, как правило, с небольшой молекулярной массой — особенно при иммунизации низкими дозами (например, инсулин, цитохром с); в) алло-антигены (например, антигены гистосовместимости, иммуноглобулины) (табл. 16.2). Иммуногены каждой группы оказываются простыми антигенами по отношению к иммунизируемой особи. Полимеры аминокислот обладают простой структурой и могут содержать ограниченное число антигенных детерминант. Простые белки при введении в низких дозах, по-видимому, представляют реципиенту наиболее «антигенные» детерминанты. Аллоантигены, хотя и являют ...