Микроглобулин субъединица молекул класса I.

Хотя р2т является составной частью структур белков класса I у человека и мыши, кодирующие его гены расположены вне области МНС. В случае $2т человека не выявлено генетического полиморфизма. С помощью методов гибри-дизации соматических клеток ген $2т человека был локализован в хромосоме 15, а не в хромосоме 6, несущей гены МНС. Было показано, что белок f52m мыши имеет генетически детерминированный диморфизм, обусловливающий замещение одной аминокислоты в положении 85; наличие диморфизма позволило картировать ген $2т мыши. В результате этих исследований ген |32т мыши ; был локализован в хромосоме 2, в то время как гены МНС мыши расположены в хромосоме 17.
К настоящему времени полностью установлена первичная структура г некоторых антигенов класса I человека и мыпнзц Как уже отмечалось, методы определения структуры этих продуктов были разработаны лишь недавно, и по | большей части они представляют собой отступление от классической методологии. Тем не менее исследование первого из изученных структурных элементов молекулы HLA, р2-микроглобулина, было выполнено с помощью классических методов белковой химии.

р^-Микроглобулин человека был выделен из мочи пациентов с поражением почечных канальцев. Его мол. масса равна 11,6 кДа. Анализ аминокислотной последовательности показал, что молекула р2-микроглобулина состоит из 99 аминокислотных остатков и содержит два остатка цистеина, образующие дисульфидный мостик. Уже давно была обнаружена гомология между р^т и константными областями иммуноглобулинов, также имеющими дисульфидный мостик. Ниже мы рассмотрим эту гомологию более подробно.

Вначале полная аминокислотная последовательность была установлена для р2т человека; впоследствии была определена полная первичная структура р2ш кролика, морской свинки и мыши. При сопоставлении первичных структур (рис. 14.3) выявляется большая степень гомологии (61—74%) между этими крайне консервативными белками. На малую изменчивость {32т в ходе эволюции указывают также наличие общих антигенных детерминант на молекулах 52т позвоночных разных видов и данные о способности f52m животных низших видов формировать in vitro комплексы с антигенами класса I человека.

Важнейшие вопросы, связанные с 32т, концентрируются вокруг его роли как малой субъединицы антигенов класса I. Некоторые сведения о значении этого белка были получены при изучении линии Дауди (клетки лимфомы Бэр-китта человека), клетки которой не экспрессируют на поверхности антигены HLA-A, В и С. Оказалось, что в этих клетках дефект экспрессии связан с неспособностью продуцировать р^т. Если клетки разрушить детергентом, в лизате обнаруживаются тяжелые цепи молекул класса I, которые можно преципитиро-вать соответствующими антителами. На основании этих данных сделан вывод, что {52т необходим для транспорта молекул класса I в аппарат Гольджи и далее к поверхности клетки. Данные биохимических исследований, связанных с выделением молекул р2т из пула молекул HLA, а также анализ реакций обмена между молекулами р^т на поверхности клетки и свободными молекулами р^т в растворе свидетельствуют о том, что (52т не связан ковалентно с тяжелой цепью и не закреплен в поверхностной мембране клетки. Получение монокло-нальных антител, одни из которых узнают антигены класса I в комплексе с р^т, а другие реагируют лишь со свободными тяжелыми цепями, свидетельствует в пользу того, что в присутствии р2т молекулы класса I претерпевают антигенные изменения.