Как уже было отмечено, МНС человека содержит три локуса, А, В, С, кодирующие главные трансплантационные антигены. По серологическим данным продукт локуса А имеет около 20 аллельных вариантов, продукты локуса В — 40 вариантов и локуса С — 8 вариантов. Первоначальные структурные }: исследования антигенов HLA принесли лишь ограниченную информацию о N-концевых участках этих молекул. Наиболее полные данные о первичной структуре были получены в результате двух различных подходов. Строминжер и др. [141 получили линию клеток от донора, гомозиготного по локусам А к В. Было показано, что эта линия клеток продуцирует молекулы класса I в очень высоких количествах. Клетки культивировали в условиях, обеспечивающих накопление большой биомассы. Затем из препаратов мембран биохимическими методами выделяли два антигена, А2 и В7. Трагард и др. [15] пошли по другому пути. Они брали трупные селезенки (независимо от ЯХЛ-гаплотипа доноров), выделяли из них пул антигенов класса I и использовали его для структурных исследований.

В табл. 14.1 приведена первичная структура внеклеточных участков HLA-А2, HLA-B7 и пула молекул класса I. Структура фрагмента В7, полученного в результате обработки клеток папаином, определена полностью; секвенирова-ние трансмембранного участка почти завершено (см. табл. 14.2). Некоторые особенности этих структур заслуживают особого внимания. Прежде всего внеклеточные участки молекулы можно подразделить на три области, которые напоминают домены иммуноглобулинов и состоят приблизительно из 90 остатков каждая; эти области получили названия альфа 1, альфа 2 и альфа 3. Два ; домена, альфа 2 и альфа 3, содержат внутрицепочечные дисульфидные мостики, замыкающие петли длиной соответственно 63 и 86 аминокислотных остатков. В молекуле имеется один участок гликозилирования по остатку аспараги-на в положении 86. Трансмембранный участок молекулы состоит из незаряженных и большей частью гидрофобных остатков; он прилегает к С-концу участка, t отщепляемого папаином. Остальная часть молекулы, по-видимому, локализо- , вана на цитоплазматической стороне клеточной мембраны. Имеются данные : о том, что некоторые остатки серина в этой части молекулы фосфорилированы.

В своей первоначальной работе по расшифровке последовательностей А2 и В7 Орр и соавторы [13] отметили, что участок, определяющий аллоантиген-ность, расположен, вероятно, между остатками 65 и 83. Анализ структур А2 и В7 показывает, что вариабельность ограничена немногими областями и тяжелые цепи обладают значительной гомологией на протяжении большинства отрезков. Наиболее яркий пример гомологии представляют участки между 194-м и 271-м остатками; последовательности этих участков идентичны для всех изученных антигенов, за исключением одной-единственной замены: молекула ^ HLA-A2 в положении 253 вместо глутаминовой кислоты содержит глутамин. Тем не менее для выявления участков, определяющих аллоантигенность, | потребуется еще множество сравнительных исследований структуры аллельных

продуктов. Большую помощь при решении этого вопроса окажут данные по изучению структуры антигенов мыши.
Структурный анализ пула антигенов класса I привел к несколько неожи-данным результатам. По данным секвенирования в большинстве случаев, несмо-тря на гетерогенность пула, в каждом конкретном положении находится лишь по одной аминокислоте. За исключением 12 положений, аминокислотные остатки, выявляемые в максимальных количествах, были идентичны остаткам, опре-деляемым в аналогичных положениях молекулы HLA-B7. Это наблюдение, возможно, отражает преобладание в изучаемой популяции некоторых (немногих) вариантов молекул А, В и С или, напротив, указывает на то, что вариации достаточно широко распределены по всей длине цепи, вследствие чего боль-шинство антигенов в случайно подобранной выборке с большой вероятностью могут иметь идентичный аминокислотный остаток в любом конкретном положе-нии. Предполагается, что если бы 10—20% молекул имели различия по одному и тому же положению в цепи, соответствующее положение было бы выявлено при секвенировании. Анализируя результаты секвенирования пула цепей, следует тем не менее учитывать некоторые технические детали. Например, для получения С-концевых участков полипептидных цепей авторы использовали метод кислотного отщепления, поэтому полипептиды, не содержавшие

лабильную в кислой среде связь между аспарагиновой кислотой и пролином, выпадали из анализа последовательности С-концевого участка. Подобный нежелательный «отбор» полипептидных цепей может происходить при любом из используемых методов выделения.