Исторический очерк.

Изучение лимфокинов, действующих на Т-клетки, в основном ограничивалось факторами, выполняющими роль митогенов. Объяснялось это тем, что в течение более чем 10 лет — с 1960 по 1972 г.— не было ни одного теста,кроме теста на пролиферацию Т-клеток. Когда были разработаны методы, позволяющие исследовать образование in vitro антителообразующих клеток, а также цитолитических, хелперных и супрессорных Т-лимфоцитов, появилась воз-можность при изучении лимфокинов анализировать и указанные процессы дифференцировки. Однако в большинстве случаев из-за сложности применяемых методов было трудно отличить вклад лимфокинов, вызывающих пролиферацию, от вклада лимфокинов, обусловливающих дифференцировку.

История изучения митогенных лимфокинов подробно рассматривается в отдельных обзорах [3,4], и нет никакой необходимости останавливаться здесь на ней, кроме лишь как для того, чтобы описать некоторые открытия, обусловившие наиболее существенные успехи в изучении этого вопроса. Область клеточной иммунологии берет свое начало от пионерской работы Ноуэлла (No-well), обнаружившего, что растительные лектины, например фитогемагглюти-нин (ФГА), вызывает митоз лимфоцитов [5]. До этого открытия лимфоциты считались окончательно дифференцированными клетками, не способными к само-воспроизводству. Вскоре Касакура и Левенштейн [6], а также Гордон и Мак-Лин [71 независимо показали, что в супернатантах культур человеческих лейкоцитов присутствуют растворимые митогенные факторы. Хотя вначале предполагалось, что митогенные факторы продуцируются лимфоцитами, Бах и др. [81 обнаружили, что прилипающие клетки выделяют растворимые факторы, также обладающие митогенными свойствами. Эти данные были впоследствии подтверждены и расширены работами Гери и др. [9,10], которые ввели термин «лимфоцит-активирующий фактор» (ЛАФ, LAF) для обозначения митогенного фактора макрофагального происхождения. Экспериментальное изучение мито-генных факторов, которые, как считалось, имели либо Т-клеточное, либо макро-фагальное происхождение, оказалось трудной задачей, поскольку методы, используемые для обнаружения этих активностей, были очень похожи.

Следует отметить, что, согласно господствовавшей в 1965—1978 гг. точке зрения, функциональная роль митогенных факторов заключалась в амплификации Т-клеточного пролиферативного ответа, главной движущей силой которого считался лиганд (антиген или митоген). Эта концепция явилась логическим следствием требований, предъявляемых теми тест-системами, которые ис-пользовались тогда для определения биологической активности: для проявления митогенной активности лимфокинов необходимо было добавлять к культурам либо лектины, либо антигены.
Ключевым моментом, позволившим выделить и охарактеризовать митогенные лимфокины, продуцируемые макрофагами и Т-клетками, и понять их функциональную значимость явились данные Моргана и др. [11] о том, что кон-диционированная среда от стимулированных лектинами периферических мо~ нонуклеарных клеток крови способна поддерживать длительную пролифера-
цию культур Т-клеток. Это открытие, которое поистине можно назвать пионер-ским, открыло возможность длительного культивирования [12] и получения клонов функционально активных Т-клеток [13—15]. В результате впервые стало возможным изучать влияние митогенных лимфокинов на клонированные популяции клеток. С устранением неоднозначности, свойственной тест-системам, в которых использовалась смешанная популяция клеток-мишеней, появилась возможность разработать быстрый количественный метод для обнаружения митогенных лимфокинов, присутствовавших в разных кондиционированных средах [16].

С помощью теста на рост Т-клеток впервые было убедительно показано, что митогенные факторы, продуцируемые макрофагами и Т-лимфоцитами, различны: супернатанты, явно содержащие ЛАФ (о чем судили по костимуляции пролиферации тимоцитов), не были митогенными для клонированных цитоли-тических линий Т-лимфоцитов (ЦЛТЛ, CTLL) [17]. В последующих экспериментах была обнаружена функциональная взаимосвязь между этими двумя факторами: одновременно несколько групп исследователей показали, что ЛАФ вызывает пролиферацию Т-клеток, стимулируя синтез фактора роста, проду-цируемого Т-лимфоцитами (ТЛФР, TCGF) [18—211. Стало очевидным, что именно фактор роста Т-клеток является тем фактором, который отвечает за митоз Т-клеток, и что функция лектинов и антигенов заключается в инициации образования как ЛАФ, так и ТЛФР. Кроме того, антигены и лектины переводят Т-клетки в состояние в котором они способны специфически отвечать на фактор роста Т-клеток [22].
В результате всех этих работ стало ясно, что наконец наступил момент, когда появилась возможность начать выделение и характеристику по меньшей мере одного из факторов, которые исследователи изучали на протяжении почти 15 лет, используя неоднозначные тесты на пролиферацию лимфоцитов. Тот факт, что ЛАФ и ТЛФР неидентичны, но взаимосвязаны, помог установить ¦более стандартную номенклатуру: ЛАФ был переименован в интерлейкин 1, <ИЛ-1, IL-1), а фактор роста Т-клеток —в интерлейкин 2 (ИЛ-2, IL-2) [23]. Большинство исследователей, изучавших митогенные факторы Т-клеточного происхождения, которые были названы в соответствии с проявляемой in vitro биологической активностью, например митогенный фактор тимоцитов (ТМФ, TMF), тимоцит-активирующий фактор (ТАФ, TAF), тимоцит-стимулирующий фактор (ТСФ, TSF), хелперный фактор киллеров (КХФ, KHF), фактор, индуцирующий вторичные цитотоксические клетки (ФИВЦК, SCTF), лимфоцитар-ный митогенный фактор (ЛМФ, LMF). Таким образом, как это случилось ранее с иммуноглобулинами, на смену функциональной номенклатуре Т-клеточных митогенных лимфокинов пришла новая, отвлеченная.
Однако позднее обнаружились противоречия, связанные с номенклатурой интерлейкинов. Они остались неразрешенными до настоящего времени и серьезно осложняют интерпретацию исследуемых биологических процессов. Противоречия возникли главным образом потому, что введение подобной номенклатуры было преждевременным. Несмотря на то что тест-система, используемая для обнаружения фактора роста Т-клеток, однозначно свидетельствовала о различии IL-1 и IL-2, не было достаточно надежных биохимических данных, позволяющих приписать всю биологическую активность IL-2 одной молекуле, Так, в качестве одной из биологических активностей IL-2 первоначально предполагалась способность усиливать появление антителообразующих клеток. Обычно наличие такой активности постулирует действие IL-2 не только на Т-, но и на В-клетки. Как следствие, некоторые исследователи расширили рамки определения IL-2 и стали обозначать этим термином класс молекул с разно-
образным влиянием на Т- и В-клетки [24]. Подобная трактовка номенклатуры противоречила целям, которые преследовали ее авторы, и не исключено, что в результате одним и тем же термином стали обозначаться несколько различных молекул. Поскольку имеется определенная взаимосвязь между номенклатурой и нашими представлениями о биологических процессах, эта тенденция приостановила дальнейшее разграничение лимфокинов, регулирующих пролиферацию и дифференцировку лимфоцитов, и в настоящее время направление, изучающее лимфокины, находится в динамическом состоянии. Скорее всего терминология и принятые сейчас биологические концепции в будущем изменятся. Поэтому очень важно понимать природу противоречий номенклатуры и их последствия для трактовки биологических процессов. Действительно, дальнейшее развитие наших представлений о лимфокинах зависит от постановки экспериментальных вопросов, что тесно связано с используемой нами номенклатурой и определениями. В связи с тем что первоначальное название изучаемых лимфокинов по-прежнему основывается на измеряемой биологической активности, по-видимому, лучше всего продолжать наименовать интерлейкины в соответствии с этими активностями до тех пор, пока не будут получены однозначные биохимические данные, которые позволят отличить молекулы друг от друга. Здесь уместна аналогия с иммуноглобулинами: хотя и IgM, и IgG оба являются иммуноглобулинами, их структура и спектр биологических активностей заметно различаются. Поэтому термин интерлейкин, обозначающий в настоящее время класс биологически активных молекул, аналогичен термину иммуноглобулин и подразумевает наличие внутри семейства интерлейкинов нескольких типов молекул, различных по структуре и выполняемой функции. Пока название IL-1 следует закрепить за синтезируемым макрофагами фактором, усиливающим секрецию IL-2 Т-клетками и таким путем способствующим пролиферации Т-лимфоцитов. Название IL-2 следует сохранить за продуцируемым Т-клетками фактором, стимулирующим митоз Т-лимфоцитов. При желании приписать этим молекулам другие биологические активности исследователю надлежит доказать, что изучаемая активность обусловлена той же самой молекулой, а не другими лимфокинами, которые могут находиться в частично очищенных препаратах. Только при соблюдении известной строгости можно будет достигнуть успехов в выяснении структуры и функции этих иммунологически важных молекул.