В настоящее время существуют две различные точки зрения на то, каким образом клетки начинают продуцировать определенный изотип (рис. 19.1). Одна из теорий (мультилинейная модель) предсказывает, что каждая индивидуальная В-клетка запрограммирована для образования определенного изо-типа точно так же, как В-клетки запрограммированы на синтез определенногосоответствии с этой моделью развитие В-клетки сопровождается ее коммитированностью к определенному классу без каких-либо внешних воздействий, таких, как стимуляция антигеном или Т-В-взаимодействия. В пользу этого предположения свидетельствует тот факт, что у некоторых видов развитие плода и новорожденного сопровождается последовательной экспрессией клеток, несущих на своей поверхности IgM, IgG и IgA и продуцирующих эти изотипы при стимуляции митогенами. Тем не менее в популяции зрелых В-клеток доминируют клетки, несущие IgM или IgM в сочетании с IgD, и менее 1—3% клеток экспрессируют любые другие изотипы Ig.Противоположная точка зрения (однолинейная модель) состоит в том, что, несмотря на существование некоторых клеток, несущих изотипы, отличные от [gM или IgD, предназначенных для образования данного изотипа или изоти-пов, подавляющее большинство В-клеток плюрипотентно в плане способности их клонального потомства синтезировать различные изотипы. Таким образом, хотя каждая конкретная В-клетка и ее клональное потомство монопотентны относительно специфичности своего вариабельного участка (клонотипа), ограничений, касающихся потенциала изотипов, практически не существует, особенно у зрелых В-клеток. В ранних работах, лежащих в основе этой теории, были обнаружены миеломные белки, имеющие одинаковый вариабельный участок, но экспрессирующие его на двух различных изотипах тяжелых цепей [81. Кроме того, в ряде исследований было показано, что изредка удается обнаружить индивидуальные бляшкообразующие клетки (БОК), способные экспресси-ровать антитела более чем одного изотипа [9]. Наиболее показательные эксперименты осуществлялись in vitro, с использованием метода селезеночных колоний (фокальных узелков) [10]. Этот метод позволяет анализировать антитела, синтезируемые клональным потомством отдельной изолированной, стимулированной антигеном В-клетки в культуре фрагментов селезенки. Такие культуры получают путем переноса лимитирующего количества В-клеток летально облученному реципиенту, примированному носителем. Примирование реципиента обеспечивает максимальную помощь Т-клеток при ответе донорских В-клеток. Через день селезенку реципиента удаляют и разрезают на кусочки в 1 мм, которые затем инкубируют в присутствии антигена. Поскольку число перенесенных донорских клеток подбирается таким образом, что каждый фрагмент или содержит только одну В-клетку, реагирующую на данный антиген, или совсем не содержит таких клеток, тест является клональным. Ответы, полученные этим способом, не только моноклональны по происхождению, но и обеспечивают мак* симальное количество антител, продуцируемых каждым клоном, и максималь-ную способность экспрессировать все изотипы Ig.

Эксперименты, проведенные с помощью этого метода, показали, что одна В-клетка при стимуляции антигеном в присутствии хелперных Т-клеток может дать потомство, синтезирующее антитела по крайней мере трех изотипов, обла-дающих каждый идентичным идиотипом вариабельного участка [11]. С помощью аналогичных опытов эти закономерности были распространены на некоторые другие антигенные системы. Очевидно, во многих случаях подавляющее большинство первичных В-клеток способно при стимуляции антигеном давать начало дочерним клеткам, которые будут продуцировать антитела как минимум двух изотипов, а возможно, и 6—7 [12]. Впоследствии было показано, что кло-нированные линии гибридом также в состоянии переключаться с одного изотипа на другой при сохранении одного и того же вариабельного участка [13].

Хотя для всех систем обнаружена некоторая связь между способностью синтезировать множество изотипов и стадией развития данной В-клетки, тот факт, что почти все зрелые В-клетки плюрипотентны в отношении образования изотипов, имеет крайне важные последствия. Если большинство В-клеток способно производить любое количество разных изотипов, тогда доминирование одного из них при ответе на данный антиген (например, при ответе В-клеток в различных физиологических условиях) должно определяться либо непосредственно в момент антигенной стимуляции, либо при последующих регуляторных событиях. Таким образом, экспрессия изотипа в меньшей степени зависит от того, какая из В-клеток простимулировалась, а в большей степени — от того, каким образом это произошло, и (или) от того, как регулируется ее последующая клональная пролиферация и экспрессия Ig. Как будет показано в дальнейших разделах, эта регуляция может быть высокоспецифичной и либо поло-жительной, приводящей к усилению экспрессии данного изотипа, либо отрица-тельной, состоящей в ее подавлении.