Ряд данных указывает на то, что митоз Т-клеток обусловлен взаимодействием растворимых факторов, секретируемых Т-к летками, с активированными антигеном (или лектином) Т-лимфоцитами. Как уже было отмечено в предыдущем разделе, когда речь шла об IL-1, тщательное удаление макрофагов предотвращает биосинтез ДНК и деление клеток под действием антигена или лектина [26, 32]. Этот факт убедительно свидетельствует о том, что сигнал к делениюклетка получает не от лектина или антигена. Дополнительные доводы в пользу такого предположения дает изучение механизма торможения глюкокортикоидами деления Т-клеток. Детальные исследования показали, что глюкокортикоиды ингибируют митоз стимулированных антигеном (или лектином) Т-клеток, изби-рательно влияя на секрецию IL-2, причем этот эффект зависит от концентрации фактора [34, 35]. Действие глюкокортикоидов не связано с общим подавлением метаболизма Т-клеток: на это указывает обратимость ингибирования пролифе-рации Т-клеток, вызываемого глюкокортикоидами, при добавлении в среду экзо-генного IL-2.
Для решения вопроса, дает ли сигнал Т-клетке к делению антиген (или лектин) или же лимфокин, были использованы моноклональные антитела, ней-трализующие биологическую активность IL-2 и, таким образом, подавляющие пролиферацию клонированных IL-2-зависимых Т-клеточных линий [36—38]. Добавление таких антител к спленоцитам, стимулированным лектином или аллоантигеном, приводит к существенному торможению пролиферации, оце-ниваемому по включению 3H-Tdr. Тем не менее эти данные следует интерпре-тировать с большой осторожностью, поскольку не было проверено, снимается ли избытком IL-2 торможение пролиферации такими антителами. На величину пролиферативного ответа Т-клеток могут влиять многие неспецифические инги-биторы. Поэтому необходимо проверить специфичность проявляемого антителами эффекта. Кроме того, обязательно должны быть поставлены контрольные опыты по изучению действия эквивалентных количеств антител на клетки, не зависящие в своем росте от IL-2. Гипотеза о том, что не лектин (и не антиген), а какая-то другая молекула вызывает митоз Т-клеток, подтверждается данными, впервые опубликованными Морганом и др. [11], согласно которым кондиционированная среда от стимулированных лимфоцитов, а не лектин способна поддерживать длительный рост Т-клеток. Не следует считать доказанным, что биологическая активность, приписываемая IL-2, опосредуется только одной молекулой, поскольку до последнего времени гомогенный IL-2 не испытывался в опытах по изучению длительного роста лимфоцитов и действия глюкокортикоидов. Тем не менее описанные выше эксперименты, в которых было проверено, как сказывается удаление макрофагов и введение глюкокортикоидов на пролиферацию Т-клеток, показывают, что пролиферация является результатом действия растворимых факторов, а не антигенов или лектинов, которые, как считалось ранее, вызывают митоз Т-клеток.
Поскольку активность, обнаруживаемую в тесте на присутствие IL-2, все еще не следует приписывать единственной молекуле, остается неясным, вызывается ли пролиферация разных субпопуляций Т-лимфоцитов одним и тем же или разными факторами. Кроме того, как уже отмечалось для IL-1, из-за отсутствия гомогенных препаратов было бы преждевременным приписывать IL-2 какие-либо иные активности помимо способности стимулировать митоз Т-клеток. Более разумно было бы считать биологической активностью IL-2 только ту, которую можно однозначно определить, а именно способность вызывать митоз клонированных IL-2-зависимых цитолитических Т-лимфоцитов. Накапливаются данные о том, что среди лейкоцитов только активированные лектином (или антигеном) Т-клетки отвечают на IL-2. Однако еще рано делать вывод, что все субпопуляции Т-клеток пролиферируют под действием IL-2, поскольку определение его ведется по росту лишь цитолитических Т-лимфоцитов. Возможно, что Т-хелперы и Т-супрессоры отвечают на очень схожие, но не идентичные Т-клеточные факторы роста.
Проведенные недавно исследования показали, что во взаимодействии IL-2 с активированной Т-клеткой участвует мембранная молекула, обладающая свой-

ствами, характерными для рецептора полипептидных гормонов, а именно: высокой аффинностью, присутствием лишь на клетке-мишени и специфичностью к гормону [39]. Вычисленная по результатам равновесного диализа, а также по кинетике связывания биосинтетически меченного IL-2 человека целыми клетками или выделенными плазматическими мембранами константа диссоциации Кй оказалась равной 5-10~i2 М [40] (рис. 21.2). Связывание радиоактивно меченного IL-2 характеризуется кривой насыщения, причем уровень неспецифической сорбции не превышает 3—4 %. В соответствии с тем, что IL-2 вызываетмитоз лишь активированных антигеном или лектином Т-лимфоцитов, центры связывания IL-2 обнаруживаются только на Т-клетках, стимулированных антигеном (или лектином). Радиоактивно меченный IL-2 не связывается с В-клетками (неактивированными и ЛПС-активированными В-клетками, трансформированными В-клеточными линиями): этот факт весьма существен для решения вопроса, действует ли IL-2 не только на Т-, но и на В-лимфоциты? Ввиду того что большинство экспериментов, где изучалось действие IL-2 на В-клетки, проводилось с теми концентрациями IL-2, в которых наблюдаются связывание его Т-клетками и Т-клеточная пролиферация, отсутствие заметного высокоаффин-ного связывания радиоактивно меченного IL-2 В-клетками убедительно свидетельствует о том, что В-лимфоциты не являются мишенями IL-2.
Количество меченого IL-2, связывающегося с цельными клетками, и количество IL-2, вызывающего пролиферацию Т-лимфоцитов, практически идентичны. Тесная корреляция констант диссоциации, измеренных по равновесному связыванию IL-2 с интактными клетками или очищенными плазматическими мембранами, с константами, определенными по кинетике связывания IL-2 с плазматическими мембранами, показывает, что взаимодействие IL-2 с рецептором подчиняется физико-химическим закономерностям, характерным для взаимодействий лиганд—полимер. Следовательно, идентичность кривых, характеризующих связывание и биологический эффект, говорит о том, что в физио-логических условиях переменными величинами, определяющими уровень биологического ответа, являются концентрация IL-2, число молекул рецептора и его аффинность1.