Физиологическое состояние организма.

После исследований, проведенных в 1950 г. Медаваром и др. [17, 20—22, 25, 107—109], стало очевидным, что, хотя толерантность можно вызвать и у взрослых животных, значительно легче индуцировать ее у несозревших животных (эмбрионов и новорожденных). Кохен и Торбекке [110], а затем Фридман [111] показали, что введение новорожденным животным зрелых лимфоидных клеток снижает их чувствительность к индукции толерантности. И все же не следует забывать, что эмбрионы и новорожденные животные способны давать иммунный ответ, если доза антигена не является избыточной [112—116].

Механизм, обусловливающий более высокую чувствительность животных к индукции толерантности в период, предшествующий созреванию иммунной системы, оставался непонятным вплоть до 70-х годов, когда в результате серии опытов [117—120] было показано, что и in vivo, и in vitro незрелые В-клетки (как от новорожденных, так и из костного мозга взрослых) более чувствительны к индукции толерантности большинством антигенов, чем зрелые В-клетки. Так, под влиянием низких концентраций антигена незрелые В-клетки специфически толерировались, в то время как на зрелые В-клетки эти концентрации либо совсем не влияли, либо стимулировали их. По-видимому, повышенная чувствительность к индукции толерантности характерна по крайней мере для одной из стадий созревания В-клеток в ходе онтогенеза. Кроме того, было пока-
зано, что В-клетки новорожденных и взрослых мышей ведут себя весьма различно по отношению к антииммуноглобулинам [121—124]. Чтобы вызвать кэппинг поверхностных иммуноглобулинов у незрелых В-лимфоцитов, требуются зна-чительно более высокие концентрации антииммуноглобулиновых антител. После кэппинга и исчезновения иммуноглобулинов с поверхности зрелых В-клеток наблюдается быстрый их ресинтез. В-клетки новорожденных мышей не в состоя-нии ресинтезировать поверхностные иммуноглобулины после кэппинга. У не-зрелых В-клеток кэппинг, вызванный антииммуноглобулинами, приводит к ис-чезновению поверхностных рецепторов для антигенов. Возможно, в случае ре-цепторов незрелых В-клеток, перекрестно связанных поливалентным антигеном, кэппинг также нриводит к тому, что клетка лишается рецепторов для антигенов и становится толерантной.

Различия между идиотипической супрессией, индуцированной у новорожденных и взрослых животных, также, по-видимому, указывают на существование различий в свойствах «незрелых» и «зрелых» В-лимфоцитов. Клетки, полученные от супрессированных взрослых мышей, после их отмывания и культивирования в присутствии антигена продуцируют супрессированный идиотип. Напротив, в клетках новорожденных супрессированных мышей способность продуцировать идиотип при культивировании in vitro не восстанавливается [125]. Аналогично этому при последующем культивировании можно выявить с помощью флюоресцентной микроскопии идиотип на поверхности лимфоидных клеток, полученных от супрессированных взрослых мышей, тогда как на поверхности культивируемых клеток, полученных от мышей, супрессированных неонатально, идиотип не презентирован [1253. На основании полученных результатов можно предположить, что у взрослых животных идиотипическая супрессия обусловлена обратимой блокадой рецепторов, тогда как у новорожденных — клональной делецией. Восстановление способности продуцировать идиотип после клональной делеции зависит от образования новых клеток из предшественников в костном мозге. Очевидно, подобный процесс будет более медленным, чем восстановление после обратимой блокады рецепторов. Это предположение согласуется с тем, что идиотипическая супрессия, индуцированная у новорожденных животных, длится дольше, чем у взрослых [125, 127—129]. Все это, вместе взятое, подтверждает постулат о том, что на некоторой стадии своего развития В-лим-фоциты проходят через фазу, в которой они особенно чувствительны к индукции толерантности. Следует заметить, что далеко не все антигены легко индуцируют толерантность у незрелых клеток. Кривые зависимости доза — эффект для индукции толерантности гетерологичным неагрегированным гамма-глобулином одинаковы для эмбриональных и зрелых В-клеток [120]. Следует подчеркнуть, кроме того, что для индукции толерантности у незрелых В-клеток недостаточно простого воздействия на них антигеном. Популяция незрелых В-клеток так же, как и популяция зрелых В-клеток, способна различать толерогенную и нетоле-рогенную формы антигена [130]. Возможно, в относительной легкости индукции толерантности у животных с еще не созревшей иммунной системой играет роль не только высокая чувствительность незрелых В-клеток, но и другие факторы. Например, как показали Мозир и Джонсон [131], у новорожденных мышей очень активна популяция супрессорных Т-клеток. Кроме того, было выска-з ано предположение, что важную роль в «защите» В-лимфоцитов от возникно-вения толерантности играет активность Т-хелперов. По-видимому, недостаточная функциональная активность хелперов или макрофагов у новорожденных животных способствует относительной легкости индукции толерантности. Несмотря на большое количество данных, свидетельствующих о том, что незрелые В-клетки особенно чувствительны к индукции толерантности, еле-
дует указать и на некоторые исключения из этого правила. Так, кривые, опи-сывающие зависимость между дозой полисахарида пневмококка и индукцией толерантности, идентичны у взрослых и незрелых мышей [112]. Это доказано в экспериментах in vitro [132]. Аналогично при использовании в качестве толе-рогена ультрацентрифугированного БГГ не было обнаружено разницы между клетками эмбриональных или новорожденных мышей и клетками взрослых животных [120]. В чем причина нетипичного поведения этих толерогенов — неясно. Вообще, как правило, индуцировать толерантность у предварительно им-мунизированных животных труднее, чем у иммунологически нативных [133]. Это различие, по-видимому, обусловлено несколькими факторами. У иммунных животных имеются увеличенные популяции специфических Т-хелперов и В-клеток памяти. Популяция В-лимфоцитов иммунных животных смещается в сторону большей аффинности, и в результате у них может повыситься чувствительность к стимуляции антигеном. Зрелые клетки памяти животных, контактировавших с антигеном, возможно, относительно устойчивы к индукции толерантности. Антитела, присутствующие в сыворотке иммунизированных животных, могут усилить иммунный ответ, возможно, путем агрегации антигена и облегчения его локализации, блокируя тем самым индукцию толерантности [134]. Изменения в идиотип-антиидиотипической сети, индуцированные предварительным введением антигена, могут стабилизировать способность иммунной системы животного к ответу. Однако многие исследователи успешно индуцировали толерантность у ранее иммунизированных взрослых животных. Как правило, это требовало повторного введения чрезвычайно высоких доз антигена. Исключением является использование неиммуногенных носителей, таких, как наиболее хорошо изученный сополимер D-глутаминовой кислоты и D-лизина (D-Glu-D-Lys, D-GL). Относительно низкие дозы конъюгата (D-GL) легко индуцируют гаптен-специфическую В-клеточную толерантность у мышей, первично иммунизированных D-GL даже в присутствии циркулирующих антител [135—136]. Аналогично гаптен-специфическая толерантность была вызвана у предварительно иммунизированных мышей введением им гаптена, связанного с сингенным или аутологичным носителем (например, глобулином или эритроцитами) [137—140]. Некоторые модифицированные антигены (например, денатурированные мочевиной) неожиданно оказались способными индуцировать ареактивность у предварительно примированных животных, особенно в отношении IgE-ответа [98, 141, 142]. Полисахариды — и как антигены, и как носители — также эффективно индуцируют ареактивность у примированных животных [32, 73].