Помимо степени зрелости В-клеток, принимающих участие в иммунном ответе, уровень экспрессии изотипов, возможно, определяется отчасти конфигурацией генов, кодирующих различные изотипы, внутри локуса генов тяжелых цепей. Ген СНц расположен на 5-конце локуса генов тяжелых цепей и, как было давно обнаружено, первым изотипом, выявляющимся при иммунном ответе, является IgM. Действительно, изучение влияния анти-IgM на образование изотипов, а также на появление классов Ig в процессе онтогенеза и кинетику их появления после стимуляции антигеном показало, что IgM играют центральную роль в механизме переключения тяжелых цепей и все IgG- и IgA-проду-цирующие клетки развиваются из IgM-секретирующих клеток [25]. Аналогичные данные позволили предположить, что IgG-продуцирующие клетки — предшественники IgA-синтезирующих клеток, хотя в многочисленных опытах было показано, что последовательные превращения IgM -> IgG —»- IgA необязательны и что клетки, секретирующие IgA, могут возникать из IgM-предшественников независимо. Однако помимо того, что при иммунном ответе IgM появляются первыми, у нас мало оснований предполагать последовательное, заранее запрограммированное появление остальных изотипов. Пасанен и др. [28] при детальном анализе кинетики иммунного ответа на пневмококковый полисахарид типа III наблюдал появление на 3-й день секретирующих IgM бляшкообразующих клеток (БОК). На 4-й и 5-й день они секретировали одновременно IgM и либо IgGl, IgG2, либо IgA. На 7-й день большинство БОК секретировали лишь один из указанных классов антител. Аналогичным образом, используя тринитрофенил-фикол в качестве антигена для стимуляции бестимусных мышей, лишенных Т-клеток, Монжини и др. [29] не обнаружили дифференцированного появления каких бы то ни было подклассов IgG. Однако щ они отметили, что при внесении в экспериментальную систему Т-клеток макси-I мальные титры IgGl, IgG2a, IgG2b и IgG3 наблюдались на несколько дней щ раньше, чем в контроле, в отсутствие Т-клеток. На основании этих данныхМонжини и др. высказали предположение о том, что Т-клетки могут, по-види-мому, каким-то образом влиять на скорость дифференцировки в IgG-проду-центы.
Опыты с использованием TD-клонирующих методов показали, что значи-тельная часть антителопродуцирующих клонов секретирует множество изотипов. Интерпретация данных о кинетике появления различных изотипов внутри клона привела к тем же результатам: не было различий в появлении изотипов IgG, IgA или IgE. Конечно, эти данные не согласуются с моделью последовательного переключения с одной тяжелой цепи на другую в соответствии с порядком расположения генов в ДНК. Напротив, они более соответствуют такому механизму, при котором одна дочерняя клетка клона секретирует один класс Ig, в то время как другая может переключиться на синтез совершенно другого класса Ig [14, 30]. Однако, поскольку переключение генов Сн в направлении 5-конца менее вероятно, в ходе иммунного ответа будет наблюдаться тенденция к появлению изотипов, кодируемых генами, расположенными в направлении З-конца.

Ингибирование цитокинеза приводит к увеличению количества как двухъ-ядерных клеток, так и клеток, содержащих два изотипа. Отсюда напрашивается вывод, что процесс переключения тяжелых цепей происходит одновременно с делением клетки [31]. Более того, поскольку часть генов Сн, по-видимому, теряется при переключении классов (по крайней мере у трансформированных клеточных линий), можно заключить, что процесс переключения классов в направлении от гена Ъ-Сн к гену 3-СН необратим [15]. Большинство экспериментов, связанных с переключением классов, согласуются с гипотезой о переключении тяжелых цепей от 5-конца к З-концу. Между тем Радбрух и др. [32] сообщили о том, что в одном из вариантов миеломы Х63 переключение происходит в противоположном направлении — от Сн7гь к QHVI* Более того, у стимулированных антигеном В-клеток обнаружено переключение IgA ->-—>- IgG [30]. Это очень интересное наблюдение в свете данных, полученных при изучении миеломы линии МС101, у которой переключение, видимо, происходит в направлении С^ ->¦ Са -»~ Сп [33]. Переключение классов тяжелых цепей в направлении от 3 -к 5-концу трудно объяснить с помощью рассмотренной выше делеционной модели, предусматривающей образование ДНК-петли. Однако оно хорошо вписывается в модель обмена сестринскими хроматидами при экспрессии Ig. Следует отметить, что число рекомбинаций, необходимых для переключения от З-конца к 5-концу, согласно второй модели, больше, чем это необходимо для переключения в обратном направлении, и соответственно клонов с переключением от 5-конца к З-концу должно быть больше, чем клонов, у которых переключение идет в противоположном направлении.